冷杉性成拿大针油针油挥发与加一俄罗较与斯松分比分析
松针（Pine needle）为松科（Pinaceae）植物树叶，俄罗广泛分布于全球，斯松杉针共有10个属约230多个品种，针油中国分布大约有10个属约120多种。加拿松针资源来源主要包括黄山松、大冷油松、油挥红松、发性分析云南松、成分高山松、比较雪松等、俄罗白皮松、斯松杉针地盘松、针油巴山松、加拿海南五针松、大冷火炬松等。油挥松针挥发油通常以针叶树嫩枝和绿叶作为原料，采用水蒸气蒸馏、超临界提取、有机溶剂等方法提取，一般松针含油量为0.4％～0.6％，多者达1％，具有杀菌、杀虫、除臭、抗氧化等多种药理活性，广泛应用于日用化工、医药和食品工业等领域。
目前，国内外关于马尾松、地中海松、加那利松、南欧黑松、樟子松、马尾松、湿地松、云南松、油松等松树种类的挥发油的成分研究已有报道，但至今未见俄罗斯松针以及加拿大冷杉针油成分对比研究报道。本实验以俄罗斯松针、加拿大冷杉针作为研究对象，采用水蒸气蒸馏法提取挥发油，采用GC/MS对其成分进行了分析，经质谱检索后，匹配度结合保留指数对其定性，较好地鉴别了同分异构体或同系物，避免了在定性过程中出现误判，提高定性的准确性。另外，通过对两种不同松针精油挥发性成分进行了对比分析研究，为其在日用化工、医药和食品工业等领域应用提供了指导。
一、材料与方法
1、材料与设备
（1）材料与试剂
俄罗斯松针叶、加拿大冷杉叶：购于市场；二氯甲烷、甲醇、正己烷：GR级，购置于百灵威科技有限公司；正构烷烃C7～C30：购置于Sigma—Aidrich公司。
（2）仪器与设备
Agilent7890A/5975C气相色谱一质谱联用仪+自动进样器（美国安捷伦科技有限公司）；万分之一电子天平（瑞士MettlerTloede公司）；磨口挥发油提取仪（北京市永光明医疗仪器厂）；10mL移液器（德国Eppendorf公司）。
2、方法
（1）松针叶油提取
取新鲜针叶样品剪成0.5cm小段，称取100g置于圆底烧瓶中，加入1000 mL蒸馏水，水蒸气蒸馏法提取4 h后静置分层3h，取得针叶油为黄色油状物，用无水乙醚溶解并用无水硫酸钠进行干燥，获得松针油。
（2）松针油挥发性成分分析
准确称取松针油0.20g，用甲醇：二氯甲烷（体积比为1∶4）混合溶液稀释到10mL，进样前需要将样品用0.45μm有机相滤膜过滤，直接进GC/MS分析。色谱条件：RXi～5sil MS石英毛细管柱（60m×0.25mm×0.25μm），载气为氦气（纯度为99.99％），流速：1.0 mL/min。升温程序：初始温度50℃，保持2min；以3℃/min的速率升温至180℃再以10℃/min的速率升温至230℃，保持10min。进样口温度：250℃，进样量：1.0μL，分流比：20∶1，溶剂延迟6min。质谱条件：电轰击电离（EI）源；离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃；电离能量：70 eV；传输线温度：280℃；扫描范围（m/z）：40～450；质谱检索图库：NIST谱库。
（3）定性方法
移取正构烷烃C7～C30标准品，用正己烷溶液将其稀释成质量分数为5％溶液，准确称取松针油0.20g，用甲醇：二氯甲烷（体积比为1∶4）混合溶液稀释到10mL，进样前需要将样品用0.45μm有机相滤膜过滤，直接进GC/MS分析。色谱条件：RXi～5sil MS石英毛细管柱（60m×0.25mm×0.25μm），载气为氦气（纯度为99.99％），流速：1.0 mL/min。升温程序：初始温度50℃，保持2min；以3℃/min的速率升温至180℃#再以lO℃/min的速率升温至230℃，保持10min。进样口温度：250℃，进样量：1.0μL，分流比：20∶1，溶剂延迟6min。质谱条件：电轰击电离（EI）源；离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃；电离能量：70 eV；传输线温度：280℃；扫描范围（m/z）：40～450；质谱检索图库：NIST谱库。求出正构烷烃C7～C30保留时间，为下一步计算松针油中各成分保留指数作准备。
根据VandenDool和Kratz的线性程序升温的保留指数原理，利用自编软件求得保留指数（KI）值：
式中：tx——被分析组分；
tn——碳原子数；
tn+1——n和n+l的正构烷烃流出峰的保留时间（min）。
样品松针油经过GC/MS分析后，利用仪器自带的NIST质谱库对松针油中化学成分进行自动检索，然后通过自我开发的保留指数软件求出各成分保留指数，将软件计算的保留指数与ESO精油数据库中保留指数进行比对（可接受误差不超过3％），对其进行定性。
（4）数据处理
样品松针油经过GC/MS分析后，采用色谱峰面积归-化法计算得出各化学成分相对百分含量。
二、结果与讨论
1、松针油挥发性成分分析
松针油中成分经GC/MS检测所得到总离子流色谱图见图1、图2，其结果采用Nistll进行检索后结合ESO香精保留指数进行对比对其定性，利用面积归-化法计算得出松针油中各成分相对百分含量，结果见表1所示。
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相关链接：正己烷，二氯甲烷，甲醇
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